发布日期：2024-10-14 16:16    点击次数：82

[滑稽笑]支原体感染原因：细胞培养过程中，支原体感染发生率达到63%，被支原体污染后，如果细胞活性好，能自主把支原体代谢掉，因而细胞的生长率一般不会有显著的变化，细胞被支原体污染一般难以察觉。1. 但是，当细胞进行基因敲低或者过表达诱导死亡或者增殖抑制时，细胞活性变差，支原体就会大量爆发。2. 这也就是很多人咨询，为什么做实验之前，细胞好好的，一做细胞转染，或者加药处理，细胞就变得很脏，背景黑糊糊一片。这也说明，细胞转染或药物处理等实验操作，保证细胞活性及其重要3. 同样，包毒的293T，如果有支原体感染，收集的慢病毒上清就被污染，再去感染目的细胞，继而细胞被支原体污染。 [滑稽笑]如何检测判断支原体污染：支原体DNA容易被Hoechst33258此荧光剂染上，被支原体污染之细胞经染色后，在细胞核外与细胞周围可看到许多大小均一的荧光小点。直接镜下观察，细胞背景有灰尘样一层黑色，清洗铺板变好一点，但是养第二天又变差，然后细胞增殖变慢，半死不活，大概率就是支原体污染。 [滑稽笑]支原体污染处理方法：不珍贵细胞，及时丢弃。珍贵细胞可用商品化支原体抑制剂处理（另一篇文章有推荐可信的毒性低的进口牌子支原体抑制剂）。不推荐一些不专业的左氧等处理。毕竟成分复杂，毒性大，浓度也不确定，万一对细胞实验结果产生影响。 [滑稽笑]为保证细胞活性，强烈推荐细胞转染时，转染试剂用上海拜奥森NBtrans，高效低毒，对细胞活性几乎无影响；慢病毒都是用无支原体污染的高活性293T包装，进而保证感染目的细胞不会受支原体感染。